濕熱滅菌柜使用滅菌的四個階段如下: 先是升溫準備階段。滅菌箱的夾克先進導入蒸汽,使夾克升溫到121的同時加熱夾克內(nèi)部的空氣。作用于夾克升溫的內(nèi)室升溫作用于蒸汽時,蒸汽接觸的內(nèi)壁和內(nèi)部空氣凝結(jié)而不成水。如果不升溫,熱蒸汽與冷內(nèi)壁和空氣接觸會產(chǎn)生冷凝水,存在內(nèi)腔溫度不均勻、滅菌物干燥度不充分等問題。
之后是升溫階段。可以用真空泵利用水流排出滅菌箱內(nèi)的冷空氣,在達到負壓狀態(tài)的同時排出滅菌物內(nèi)部的空氣。然后投入飽和熱蒸汽,迅速滲透到物體內(nèi)部,即可獲得飽和蒸汽置換空氣的效果。重復(fù)這三次或四次,空氣置換會比較*,溫度會上升到121。
之后,是滅菌階段。滅菌階段,連續(xù)投入少量飽和蒸汽,排除部分蒸汽。內(nèi)室溫度保持在121,內(nèi)室壓力約為110KPa左右。在高溫和高壓的作用下,使微生物蛋白變性凝固失活達到滅菌要求。
最后是干燥階段。抽真空釋放內(nèi)部蒸汽,然后補充過濾后的熱壓縮空氣。(滅菌柜有換熱器和除菌過濾器,壓縮空氣進入內(nèi)腔先用除菌過濾器過濾,再用換熱器加熱進入設(shè)備內(nèi)腔。如果不加熱,冷壓縮空氣就會進入內(nèi)腔使蒸汽凝結(jié)成水,如果不過濾就會導入細菌,滅菌失敗。)在這里強調(diào),干燥是與升溫幾乎相反的過程。
濕熱滅菌柜常用的幾種滅菌方法:
1、高壓蒸汽滅菌法:壓力蒸汽滅菌在專業(yè)壓力蒸汽滅菌器中進行,是一種普遍用于熱滅菌、效果可靠的方法。其優(yōu)點是貫通力強,滅菌效果可靠,能殺滅所有微生物。
2、巴氏消毒法:利用熱量殺滅液體中病原菌和常見雜菌,同時不明顯損害其質(zhì)量的消耗方法。巴斯德為消毒醇類而制作的故名。加熱61.1~62.8分鐘,或71.715~30秒鐘。常用于牛奶、酒類等的消毒。
3、流通蒸汽滅菌法:用100左右水蒸氣消毒。一般采用流通蒸汽滅菌器(其原理相當于我國蒸鍋),加熱15至39分鐘,即可殺滅細菌繁殖體。消毒物品的包裝不要太大或太緊,以利于蒸汽的滲透。
4、煮沸法:100煮沸5分鐘,可殺滅一般細菌繁殖體。很多芽孢經(jīng)過煮潮5~6小時就會死亡。向水中加入2%碳酸鈉,沸點達到105。既能促進芽孢的殺滅,又能防止金屬器生銹。煮沸法可用于飲水和一般器具(刀具、注射器等)的消毒。5、間歇滅菌法:利用多次重復(fù)流通蒸汽達到滅菌目的。一般采用流通蒸汽滅菌器,100加熱15~30分鐘,即可殺死其中的繁殖體;芽孢還留著。取出后在37的培養(yǎng)箱過夜,使芽孢發(fā)育成繁殖體,第二天再蒸一次。把這個堅持三次以上。本法適用于耐高溫營養(yǎng)素如血清培養(yǎng)基滅菌。